Chromozym PK​;58840

1. 基本信息 英文名称:Chromozym PK 中文名称:发色底物 PK CAS 号:58840 - 30 - 5 供应商:上海楚肽生物科技有限公司 2. 结构信息 Chromozym PK 的结构包含一个发色基团,常见的发色基团如对硝基苯胺...


1. 基本信息

英文名称:Chromozym PK 中文名称:发色底物 PK CAS 号:58840 - 30 - 5 供应商:上海楚肽生物科技有限公司

2. 结构信息

Chromozym PK 的结构包含一个发色基团,常见的发色基团如对硝基苯胺(p - nitroaniline)等,发色基团在酶作用下会发生颜色变化,从而用于检测酶活性 。同时,其结构中含有与特定酶(如血浆激肽释放酶等)作用的位点,当酶与该位点结合并进行催化反应时,会导致发色基团从底物上裂解下来,进而产生颜色变化 。例如,在检测血浆激肽释放酶活性时,血浆激肽释放酶特异性地作用于 Chromozym PK 的特定肽键,使发色基团游离出来,通过检测游离发色基团在特定波长下的吸光度变化,可定量分析血浆激肽释放酶的活性 。其结构设计巧妙,通过发色基团与酶作用位点的合理组合,实现对特定酶活性的灵敏检测 。

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3. 作用机理及研究进展

作用机理

Chromozym PK 主要用于酶活性检测,以血浆激肽释放酶为例,当血浆激肽释放酶与 Chromozym PK 相遇时,酶的活性中心与 Chromozym PK 上特定的肽键区域结合,酶的催化作用使该肽键断裂,发色基团从底物分子上脱离 。游离的发色基团在溶液中会表现出特定颜色,并且在特定波长下有明显的吸光度 。通过分光光度计等仪器测量反应体系在特定波长下吸光度的变化速率,即可间接反映血浆激肽释放酶的活性 。在其他酶活性检测中,如某些丝氨酸蛋白酶等,其作用机理类似,都是基于酶对 Chromozym PK 底物特定部位的催化裂解,引发发色基团的释放和颜色变化,从而实现对酶活性的定量分析 。

研究进展

在临床诊断领域,Chromozym PK 常用于血栓性疾病、出血性疾病等的辅助诊断 。通过检测血浆中相关酶(如血浆激肽释放酶、凝血因子等)的活性,帮助医生判断患者的凝血功能状态 。例如,在深静脉血栓形成患者中,血浆激肽释放酶活性可能发生变化,利用 Chromozym PK 检测其活性,可为疾病诊断和治疗方案制定提供重要依据 。在基础医学研究中,Chromozym PK 作为一种重要的工具试剂,用于研究酶的结构与功能关系 。研究人员通过对不同酶与 Chromozym PK 作用的动力学参数分析,深入了解酶的催化机制、底物特异性等 。此外,在药物研发过程中,Chromozym PK 可用于筛选和评价针对特定酶的抑制剂或激活剂 。例如,在开发抗血栓药物时,利用 Chromozym PK 检测药物对凝血相关酶活性的影响,评估药物的潜在疗效和安全性 。

4. 溶解保存

溶解

Chromozym PK 一般可溶于水或缓冲液中 。在实验中,常将其溶解在合适的缓冲体系,如 Tris - HCl 缓冲液、磷酸盐缓冲液等,缓冲液的 pH 值和离子强度需根据具体实验要求和所检测酶的最适反应条件进行调整 。例如,在检测血浆激肽释放酶活性时,可将 Chromozym PK 溶解在 pH 7.4 左右的磷酸盐缓冲液中 。在溶解过程中,需注意搅拌或超声辅助,以促进其完全溶解 。若实验需要在有机溶剂中使用,可尝试溶解在部分极性有机溶剂中,如 N,N - 二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)等,但要注意有机溶剂对酶活性和发色反应的影响,一般需进行预实验优化条件 。

保存

建议将 Chromozym PK 储存于干燥、阴凉处,温度一般控制在 2 - 8℃ 。避免光照,因为光照可能导致发色基团发生光化学反应,影响其在酶活性检测中的准确性 。由于其结构中可能含有易水解或氧化的化学键,高温、高湿度环境可能引发其结构变化,降低其在实验中的性能 。如需长期保存,可放置在 - 20℃,并密封保存,减少与空气接触,防止氧化和吸湿 。在保存过程中,要注意避免反复冻融,反复冻融可能破坏其结构,导致检测结果不准确 。

5. 相关多肽

虽然 Chromozym PK 不是多肽,但在酶活性检测领域,一些多肽类底物与它有相似的应用场景 。例如,用于检测胰蛋白酶活性的 Boc - Phe - Ser - Arg - pNA(N - α - 叔丁氧羰基 - L - 苯丙氨酰 - L - 丝氨酰 - L - 精氨酰 - 对硝基苯胺),它也是通过胰蛋白酶作用裂解,释放出对硝基苯胺发色基团来检测酶活性 。还有用于检测凝血因子 Xa 活性的 S - 2222(H - D - Phe - Pro - Arg - pNA・2HCl)等 。这些多肽类发色底物与 Chromozym PK 一样,在酶活性检测中发挥重要作用,通过对比不同底物对同一酶或不同酶的作用效果,有助于优化酶活性检测方法和深入研究酶的性质 。

6. 相关文献

[1] Fujikawa K, et al. Purification and characterization of plasma prekallikrein from human plasma. J Biol Chem. 1976 Mar 10;251(5):1416 - 23.

[2] Colman RW, et al. The plasma kallikrein - kinin system in health and disease. Blood. 1990 Aug;76(4):735 - 57.

[3] Kluft C, et al. Determination of plasma prekallikrein activity with a new chromogenic substrate. Thromb Res. 1977 Sep;11(5):657 - 64.

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发布于:湖北省

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